Monolisa™ HBe Ag-Ab PLUS 72396 96 adet HBe Ag testi - Bio-Rad
Transkript
Monolisa™ HBe Ag-Ab PLUS 72396 96 adet HBe Ag testi - Bio-Rad
Monolisa ™ HB e A g-Ab P LUS 72396 96 adet HBe Ag testi - 96 adet HBe Ab testi HBe A NT JE NLE R L E A NT - HBe A NT KORLA RI NI MM ÜNOE NZM A T K YÖ NT EML E ALG IL AM A KT malatçı kalite kontrol ü Bio-Rad irketi tarafından imal edilen ve pazarlanan tüm ürünler, hammaddelerin teslim alınmasından nihai ürünlerin pazarlanmasına kadar bir kalite güvence sistemi kontrolündedir. Her nihai ürün partisi kalite kontrole tabi tutulur ve ancak kabul kriterlerine uyduu takdirde pazarlanır. Her partinin üretim ve kontrol dokümantasyonu irketimiz tarafından muhafaza edilir. ÇNDEKLER 1. TESTN AMACI 2. KLNK ÖNEM 3. TEST PRENSB 4. KTN ÇNDEKLER 5. GEREKL OLAN ANCAK ÜRÜNLE BRLKTE VERLMEYEN DONANIM 6. ÖNLEMLER 7. HJYEN VE GÜVENLK TALMATLARI 8. REAKTFLERN YENDEN OLUTURULMASI 9. SAKLAMA - GEÇERLLK 10. NUMUNELER 11. ÇALIMA ARTLARI 12. HESAPLAMALAR VE SONUÇLARIN DEERLENDRLMES 13. REAKTF LAVELERNN SPEKTROFOTOMETR LE KONTROL EDLMES 14. PERFORMANSLAR 15. KAYNAKÇA 2 1 - TESTN A M ACI Monolisa™ HBe Ag-Ab PLUS insan serumu veya plazmasında mevcut hepatit B virüsü e antijeninin (Ag HBe) ve/veya hepatit B virüsü e antijenine yönelik antikorların (Anti-HBe) immünoenzimatik teknikle kalitatif olarak belirlenmesini salar. 2 - KLN K ÖNE M HBe antijeninin varlıı genellikle aktif viral çoalma eklinde açıa çıkar ve denein bulaıcı olduu anlamına gelir. HBe antijeni B tipi bir viral hepatitte erken ortaya çıkar ve (bir aydan daha uzun süre) kalması hepatopatinin aırlaması riskini ifade eder. HBe antijenine karı antikorların ortaya çıkması viral çoalmada düü olduu gösterir ve genellikle hastalıın ilerleyii ile ilgili olumlu bir klinik tahmini temsil eder). 3 - TEST PR ENS B a) HBe antij enin in al gılanm ası Ag HBe antijeninin algılanması iki zamanlı “sandviç” tipi immünoenzimatik bir teknie dayanır; bu teknik bir insan Anti-HBe antikoru ve farklı epitopları tanıyan murin kaynaklı (Acm1 ve Acm2) iaretlenmi bir çift monoklonal Anti-HBe antikoru kullanır. Solid faz, insan Anti-HBe antikorları ile duyarlılatırılmı 8 polistiren kaptan oluan 12 eritten olumaktadır. ki monoklonal antikor peroksidaz ile birletirilmitir. Dozaj aaıdaki reaksiyonel aamaları içerir: 1. Solid faza sabitlenen ilk insan Anti-HBe antikoru mevcut iken gerçekletirilen numune ve kontrol inkübasyonu. 2. Yıkama, ardından peroksidaz ile iaretlenmi monoklonal antikor çifti ile çözünmez kılınmı komplekslerin inkübasyona tabi tutulması. 3. Yıkama yoluyla, serbest kalan konjugatın elimine edilmesi, ardından substrat ilavesi ile solid faza balı enzimatik faaliyetin develope edilmesi. 4. Developmanın durdurulması; ardından, 450/620 nm'de optik younlukların okunması ve sonuçların yorumlanması. b) Anti-HBe antikor larının algıl anması Anti-HBe antikorlarının algılanması için, kit Anti HBe için kullanılan solid fazın aynısını kullanır. Test, nötrletirme reaktifi olarak kullanılan plazma kökenli sınırlı miktardaki HBe antijeni karısında, çözünmez kılınmı antikor ile numunede mevcut antikor arasında gerçekleen kompetisyon prensibine dayanmaktadır. Developman daha sonra, peroksidaz ile iaretlenmi baka bir çift monoklonal antikor karıımı (Acm1 ve Acm2) yardımıyla gerçekletirilir. Test aaıdaki reaksiyonel aamaları içerir: 1. Solid faza sabitlenen ilk insan Anti-HBe antikoru ve nötrletirme antijeni mevcut iken gerçekletirilen numune ve kontrol inkübasyonu. 2. Yıkama, ardından peroksidaz ile iaretlenmi monoklonal antikor çifti ile çözünmez kılınmı komplekslerin inkübasyona tabi tutulması. 3. Yıkama yoluyla, serbest kalan konjugatın elimine edilmesi, ardından substrat ilavesi ile solid faza balı enzimatik faaliyetin develope edilmesi. 4. Developmanın durdurulması; ardından, 450/620 nm'de optik younlukların okunması ve sonuçların yorumlanması. 3 4 - KTN ÇND EKL ER Tüm reaktifler "in-vitro" tehis amacıyla kullanılmaya yöneliktir Reaktifler 1 ila 12 ba ımsız ilem eklinde 2 x 96 ölçüm gerçekletirmek için yeterli miktarda verilmitir: • yani 96 Ag HBe ölçümü ve 96 Ac HBe ölçümü • ya da ezamanlı olarak 2 x 48 Ag HBe ölçümü ve 2 x 48 Anti-HBe ölçümü. ETKETLEME REAKTFLERN NTEL SUNUM R1 MKROPLAK A: Etkisiz hale getirilmi, Ag HBs açısından pozitif serumlardan elde edilen insan Anti-HBe antikorları ile duyarlı kılınmı 8 kaptan oluan 12 erit 2 plaka R2 KONSANTRE YIKAM A SOLÜS YONU (20 X) NaCl pH 7,4 Tris Tamponu Koruyucu: ProClin™ 300 (%0,04) 1 ie 235 ml R3 NEGATF KONTROL (Ag HBe/ANTI-HBe TESTLER ÇN ORTAK) AntiHIV1 ve anti-HIV 2 antikorları, HBs antijeni ve anti-HCV antikorları açısından negatif insan serumu Koruyucu: % 0,1 sodyum azid 1 ie 8 ml R4 ANT-HBe TEST POZTF KONTROLÜ Anti-HBe antikorları içeren ve potansiyel olarak AgHBs açısından pozitif, anti-HIV1 antikorları ve antiHIV2 ve anti-HCV antikorları açısından negatif, etkisiz hale getirilmi insan serumu Koruyucu: % 0,1 sodyum azid 1 ie 1,5 ml R5 Ag HBe TEST POZTF KONTROLÜ Fibrinsiz insan plazması veya Ag HBe ve Ag HBs açısından pozitif, antiHIV1, anti-HIV2 antikorları ve anti-HCV antikorları açısından negatif serum içeren, etkisiz hale getirilmi sentetik sulandırıcı Koruyucu: % 0,1 sodyum azid 1 ie 1,5 ml R6 NÖTRLETRME ANTJEN Fibrinsiz insan plazması veya Ag HBe ve Ag HBs açısından pozitif, antiHIV1, anti-HIV2 antikorları ve anti-HCV antikorları açısından negatif serum içeren, etkisiz hale getirilmi sentetik sulandırıcı Koruyucu: % 0,1 sodyum azid 1 ie 8 ml R7a 5X KONS ANTRE, ANT-HBe TEST KONJUGATI Peroksidaz ile ba lantılı 2 adet Anti-HBe monoklonal murin antikoru (Acm1 ve Acm2)* 1 ie 3 ml R7b 5X KONS ANTRE, AG HBe TEST KONJUGATI Peroksidaz ile ba lantılı 2 adet Anti-HBe monoklonal murin antikoru (Acm1 ve Acm2)* 1 ie 3 ml R8 PEROKSDAZ SUB STRAT TAMPONU % 0,015 H2O2 ve % 4 dimetilsülfoksit (DMSO) içeren sitrik asit ve sodyum asetat pH 4,0 solüsyonu 1 ie 60 ml R9 KROMOJEN Tetrametil benzidin (TMB) içeren pembe renkli solüsyon 1 ie 5 ml R10 DURDURMA SOLÜSYONU 1 N sülfürik asit solüsyonu 1 ie 28 ml SULANDIRILMI R2 ÇN BO E 1 ie 25 ml * acm1/acm2 oranları R7a ve R7b konjugatlarından her biri için farklıdır. Bu iki konjugatı birbirinin yerine kullanmayın. 4 5 - GEREKL OLA N AN CA K ÜRÜNL E BRL KTE VER LM EY EN MA LZEMEL ER Damıtık veya tamamen demineralize su. Çama ır suyu veya sodyum bikarbonat. Emici kâıt. Tek kullanımlık eldivenler. Tek kullanımlık (12 x 75 mm) polistiren borular. 50 l, 100 l, 200 l ve 1 ml'lik hacimler daıtabilen ayarlanabilir veya sabit, otomatik veya yarı otomatik pipetler • 10 ml, 50 ml, 100 ml, 1.000 ml dereceli deney tüpleri • Vorteks tipi çalkalayıcı • Kontamine atık konteyneri • Mikroplakalar* için otomatik, yarı otomatik veya manüel yıkama sistemi • 37°C ± 1 °C* termostatlı benmari veya kuru inkübatör • 450 nm ve 620 nm* filtrelerle donatılmı , mikroplaka okuma cihazı (*) Teknik servislerimiz tarafından onaylanan cihazlar konusunda tam bilgi edinmek için bize danıınız. • • • • • • 6 - ÖNLEML ER Elde edilecek sonuçların kalitesi a aıdaki laboratuar uygulamalarına tam olarak uyulmasına balıdır: • Aynı deney sırasında farklı partilere ait reaktifleri birbirine karı tırmayın. • NOT: Aynı deney boyunca hep aynı partiyi kullanmak kaydıyla, kitte teslim edilenlerden farklı yıkama solüsyonu (etiketin üzerindeki yeil 20X ibaresi ile tanıtılan, R2), substrat tamponu (mavi TMB buf. ibaresi ile tanıtılan, R8), kromojen (meneke rengi TMB 11X. ibaresi ile tanıtılan, R9) ve durdurma solüsyonu (kırmızı 1N ibaresi ile tanıtılan, R10) partileri kullanmak mümkündür. Bu reaktifler irketimizin dier ürünleri ile birlikte kullanılabilir. Ayrıca, belli bir deneyde bir tek karıımın kullanılması kaydıyla, yıkama solüsyonu (etiketin üzerindeki yeil 2 0X i bar esi ile tanıtılan, R2) düzgün bir ekilde yeniden oluturulan farklı Bio-Rad reaktif kitlerine dahil edilmi dier iki yıkama solüsyonundan biri ile (etiketin üzerindeki mavi bir 10X veya turuncu bir 10X ibaresi ile tanıtılan, R2) karıtırılabilir. Ayrıntılı bilgi edinmek için teknik servislerimizle irtibat kurunuz. • Test ismi ve test özel tanıtım numarası her mikroplaka çerçevesinin üzerinde belirtilmi tir. Bu özel tanıtım numarası her eridin üzerinde de yer alır. • Monolisa ™ HBe Ag -Ab P LUS: Özel Tanıtım Numarası = 56. • Bu tanıtım numarası her kullanımdan önce kontrol edilmelidir. Test numarası bulunmayan veya yukarıda bahsi geçen test numarasından farklı olan hiçbir erit, kullanılmamalıdır. • Son kullanma tarihi geçen reaktifleri kullanmayın. • Kullanımdan önce, reaktiflerin ortam sıcaklıında (18-30°) dengelenmesi için, 30 dakika ve sulandırılmı yıkama solüsyonu (R2) için bir saat bekleyin. • Her türlü kontaminasyonu önleyerek, reaktifleri özenle tekrar olu turun • Konjugatların enzimatik faaliyetini bozabilecek reaktif buharlar (asitler, alkaliler, aldehitler) veya tozlar mevcut iken test yapmayın. • Damıtık su ile mükemmel bir ekilde yıkanmı cam aletler veya tercihen tek kullanımlık donanım kullanın. • Yıkama i leminin sonu ile reaktiflerin daıtımı arasında geçen sürede mikroplakanın kurumasına izin vermeyin. • Her serum için yeni bir daıtım konisi kullanın. • Kapların yıkanması, yapılan i lemler açısından önemli bir a ama te kil eder: tavsiye edilen yıkama döngüleri • • • • sayısına uyun ve tüm kapların tamamen doldurulup, ardından tamamen bo altılmasına özen gösterin. Kötü bir yıkama i lemi yanlı sonuçlar elde edilmesine yol açar. Konjugatı ve developman solüsyonunu daıtmak için asla aynı kabı kullanmayın. Pipetlerin doruluunu ve hassasiyetini ve kullanılan cihazların düzgün çalı tıını konrol edin. lem protokolünü dei tirmeyin. Enzimatik developman solüsyonunu daıtmadan önce kontrol edin. Bu solüsyon pembe renkte olmalıdır. Solüsyonun rengi mavimsi ise, developman solüsyonu bozulmu tur ve testte kullanılamaz. 5 7 - HJY EN VE GÜ VENL K T ALM ATLAR I Çantadaki tüm reaktifler "in vitro" tehis amacıyla kullanılmaya yöneliktir. • Reaktifler ve numuneleri kullanırken tek kullanımlık eldivenler giyin ve söz konusu maddeleri kullandıktan sonra ellerinizi özenle yıkayın. • "Azınızla pipetlemeyin". • R3 reaktifinin (negatif kontrol) hazırlanmasında kullanılan insan kaynaklı malzeme, Hepatit B virüsü yüzey antijeni (Ag HBs), HIV virüslerine yönelik (HIV-1 ve HIV-2) antikorlar ve Hepatit C (anti-HCV) virüsüne yönelik antikorlar açısından kontrol edilmi ve reaktif olmadıı belirlenmitir. • R1 reaktifinin (duyarlı kılınmı plaka) hazırlanmasında kullanılan insan kaynaklı malzeme HIV virüslerine yönelik antikorlar (antiHIV-1 ve anti-HIV-2) ve hepatit C virüsüne (HCV) yönelik antikorlar açısından kontrol edilmi ve reaktif olmadıı belirlenmitir. Bu malzeme hepatit B virüsü yüzey antijeni (Ag HBs) açısından reaktiftir. Muhtemelen fotokimyasal olarak etkisiz hale getirilmitir. • R4 (AntiHBe testi pozitif kontrolü), R5 (Ag HBe testi pozitif kontrolü) et R6 (nötrletirme antijeni) reaktiflerinin hazırlanmasında kullanılan insan kaynaklı malzeme, HIV virüslerine yönelik antikorlar (anti-HIV-1 et antiHIV-2) ve anti-HCV antikorları açısından kontrol edilmi ve reaktif olmadıı belirlenmitir. R5 ve R6 reaktifleri hepatit B virüsü yüzey antijeni (Ag HBs) açısından pozitiftir; R4 reaktifi hepatit B virüsü yüzey antijeni (Ag HBs) açısından potansiyel olarak pozitiftir. Bu reaktifler fotokimyasal olarak etkisiz hale getirilmitir. • Hiçbir yöntem HIV, HBV, HCV virüslerinin veya dier bulaıcı ajanların bir ortamda bulunmadıını kesin bir ekilde garanti edemedii için, insan kaynaklı reaktifleri ve hasta numunelerini potansiyel olarak bulaıcı malzeme addedin ve olaan önlemler ile kullanın. • Numuneler ve insan kaynaklı reaktifler ile dorudan temas eden malzemeyi ve ayrıca yıkama solüsyonlarını kontamine ürünler addedin. • Numunelerin veya bunları içeren solüsyonların sıçramasına engel olun. • Kirlenen yüzeyler % 10 sulandırılmı çamaır suyu ile temizlenecektir. Bulaan sıvı bir asit ise, kirlenen yüzeyler önceden sodyum bikarbonat ile nötrletirilecek, ardından çamaır suyu ile temizlenecek ve emici kâıt ile kurutulacaktır. Temizleme ileminde kullanılan malzeme kontamine atıklar için öngörülmü özel bir konteynere atılmalıdır. • nsan kaynaklı numuneler ve reaktifler ve kontamine malzeme ve ürünler, bulaıcı özellikleri giderildikten sonra atılacaktır: - Bu ilem, ya % 5 sodyum hipoklorit son konsantrasyonlu çamaır suyuna (10 hacim kontamine sıvı veya su için, 1 hacim çamaır suyu) 30 dakika boyunca batırılarak, - Ya da minimum 2 saat boyunca 121°C'de otoklavlama vasıtasıyla gerçekletirilir. Otoklavlama, HIV ve HBV virüslerini etkisiz hale getirmek için en iyi yöntemdir. DKKAT: SODYUM HPOKLORT ÇEREN SOLÜSYONLARI OTOKLAVIN ÇNE SOKMAYIN. • Solüsyonları veya yıkama atık sıvılarını veya biyolojik numuneler içeren herhangi bir sıvıyı lavaboya atmadan önce, nötrletirmeyi ve/veya otoklavlamayı unutmayın. • Güvenlik verileri fii talep üzerine verilmektedir. • Kimyasal ürünler doru laboratuar uygulamalarına göre kullanılmalı ve atılmalıdır. • Substrat tamponunun, kromojenin ve durdurma solüsyonunun cilt ve mukozalar ile hiçbir ekilde temas etmesine izin vermeyin (toksisite, tahri veya yanık riski). • Bazı reaktifler sodyum azotür içerir. • Bu bileik kurun veya bakır kanalizasyonlar ile birlikte son derece patlayıcı özelliklere haiz azotürler oluturabilir. Bu tür azotürlerin kanalizasyonlarda birikmesine engel olmak için, bu reaktifleri lavaboya atarken nötrletirin ve lavaboyu bol miktarda su ile yıkayın. • Bazı reaktifler ProClin™ 300 (% 0,04, % 0,1 ve/veya % 0,5) içerir Xi Tahri e der R43: Cilt ile temas etmesi halinde duyarlılamaya yol açabilir S28-37: Cildinizle temas ettikten sonra, derhal su ve sabun ile bol bol yıkanın. Uygun eldivenler takın. 8 - REA KTFLERN YE ND EN OLU TURULM AS I Not: Kullanımd an önc e, reaktifle rin o rtam sıcaklıında ( 18- 30°C) d e ngel enmesin i salayın Mikroplak a (R1) 12 erit içeren her taıyıcı çerçeve kapalı alüminyum poet içine konulmutur. Poeti makas veya bıçak ile birleme noktasının 0,5 ila 1 cm üzerinde kesin. Poeti açın ve çerçeveyi poetten çıkarın. Kullanılmayan eritleri tekrar poetin içine yerletirin. Poeti özenle kapatın ve yeniden +2-8°C sıcaklıkta muhafaza edin. Konsantr e yıkama solüsyonu (20 X): R2 Solüsyonu damıtık su ile 20 kez sulandırın.. Bu ekilde, kullanıma hazır yıkama solüsyonu elde edilir. Bir erit için 75 ml kullanıma hazır solüsyon gerekir. Homojenletirin. 6 KONJUGATLAR Anti -HBe Test Kon jug atı (R7a) Kullanılan erit sayısına göre, R7a solüsyonunu önceden sulandırılmı olan R2 solüsyonunda 1/5 oranında sulandırın: Kull anıla n erit sayısı R7a solüsyon h acmi (ml) R2 ile sula ndırılmı miktar 1 0,2 1 2 0,4 2 3 0,6 3 4 0,8 4 5 1 5 6 1,2 6 7 1,4 7 8 1,6 8 9 1,8 9 10 2 10 11 2,2 11 12 2,4 12 Homojenletirin. Konjugat sırasıyla, kullanıma hazır 80 l s ulandırılmı R2, ardından 20 l 5X konjugat ilave edilerek, önceden sulandırılmadan da kullanılabilir. Çalkalayın. Ag HBe Test Konj ugatı (R7b ) R7a konjugatı için kullanılan protokolün aynısını kullanın. Enzimatik deve lopma n solüsyon u (R8 + R9) 1/11 oranında sulandırmaya dikkat ederek, reaktif R9'u reaktif R8'e karıtırın (10 hacim R8 içinde, 1 hacim R9). Homojenletirin. 1 ila 10 erit için, 10 ml gerekli ve yeterlidir. 9 - SAKL AM A - SON KULLA NM A TAR H Kit +2-8°C sıcaklıkta saklanmalıdır. +2-8°C sıcaklıkta saklanan kitteki her unsur kutunun üzerinde belirtilen son kullanma tarihine kadar kullanılabilir (özel bir uyarı bulunmadıı takdirde). R1: Vakumlu poetin açılmasından sonra, +2-8°C sıcaklıkta muhafaza edilen ve özenle kapatılan orijinal ambalajlarındaki eritler 1 ay dayanabilir. R2: Sulandırılmı yıkama solüsyonu +2-30°C sıcaklıkta 2 hafta saklanabilir. Konsantre yıkama solüsyonu (R2) +2- 30°C sıcaklıkta muhafaza edilebilir. R7a: Anti-HBe testinin sulandırılmı konjugatı ortam sıcaklıında (18-30°C) 8 saat saklanabilir. Sulandırılmı konjugat ıık almayan bir yerde, ortam sıcaklıında (18-30°C) saklanmalıdır. R7b: Ag-HBe testinin sulandırılmı konjugatı ortam sıcaklıında (18-30°C) 8 saat saklanabilir. Sulandırılmı konjugat ıık almayan bir yerde, ortam sıcaklıında (18-30°C) saklanmalıdır. R8 + R9: Yeniden oluturulduktan sonra, karanlıkta saklanan reaktifler ortam sıcaklıında (18-30°C) 6 saat boyunca kullanılabilir. 10 - NU MUNEL ER Olaan uygulama yöntemleriyle bir kan numunesi alın. Testler sulandırılmamı serum veya plazma numuneleri üzerinde yapılacaktır (numuneler EDTA, heparin, sitrat gibi antikoagülanlar ile alınır). Çok belirgin bir hemoliz test performanslarını etkileyebilir. Agrega içeren numuneler testten önce santrifugasyon ile arıtılmalıdır. Süspansiyon halindeki partiküller veya fibrin agregaları yanlı pozitif sonuçlar elde edilmesine yol açabilir. Tarama 7 gün içinde yapılır ise, numuneler +2-8°C sıcaklıkta saklanacaktır veya -20°C sıcaklıkta dondurulmu olarak birkaç ay saklanabilecektir. Dondurma/Çözdürme ilemlerini tekrarlamaktan kaçının. 3 defadan fazla dondurulan ve çözdürülen numuneler kullanılmamalıdır. Eer numuneler taınacak ise, bunları etyolojik ajanların taınması ile ilgili yürürlükteki mevzuata uygun ekilde ambalajlayın ve tercihen dondurulmu olarak taıyın. KONTAM NE VEYA H PERL PEM K VEYA H PERHEMOL ZE TAB TUTULMU VEYA H PERPROTE NL SERUMLAR KULLANMAYIN NOT: 100 mg/l'ye kadar bilirubin içeren numunelerde ve ayrıca 36 gr/l'ye kadar triolein içeren lipemik numunelerde ve 2,5 mg/ml'ye kadar hemoglobin içeren hemolizli numunelerde hiçbir etkileim ispatlanamamıtır. 7 45 mg/ml albumin ile aırı yükleme yapılmı negatif numunelerde, oranlarda hiperproteinemiyi takit eden bir azalma gözlemlenmitir. 11 - ÇALI MA ARTLA RI Ag HBe ve Anti-HBe testleri aynı plaka üzerinde yapılabilir. Bu durumda, size aaıdakileri tavsiye ediyoruz: • Anti-HBe testi: Sütun 1 ila 6 • Ag HBe testi: Sütun 7 ila 12 Yıkama için, asgari hacim, yıkama ve hazne baına 0,55 ml'dir. a) Anti-HBe test pr otokolü 1. 2. Yıkama solüsyonunu hazırlayın. Taıyıcı çerçeve ile gerekli sayıda eridi koruyucu ambalajdan çıkarın. Kullanılmayan eritleri tekrar ambalajın içine yerletirin ve ambalajı kapatın. 3. Kaplara art arda aaıdaki malzemeleri daıtın (önerilen plaka planı): • A1, B1, C1: 100 l negatif kontrol (R3) • D1: 100 l pozitif kontrol (R4) • E1, F1, G1: 100 l bilinmeyen numune. Kullanılan sisteme balı olarak, kontrollerin konumu veya daıtım sırası deitirilebilir. Not: Görsel olarak, effaf bo bir kap ile numune içeren (açık sarı) bir kap arasında net bir renk farkı görülebilir. 490 nm'de fotometrik ölçüm yapılarak kaplarda numune olup olmadıı kontrol edilebilir (bkz. bölüm 13: REAKTF LAVELERNN SPEKTROFOTOMETR LE KONTROL EDLMES). 4. Her kaba hızlı bir ekilde 50 l nötrletirici antijen (R6) ilave edin. Homojenletirin. Üstünü yapıkan bir filmle örtün; 37°C ± 1°C sıcaklıkta 3 saat ± 10 dakika inkübe edin. Not: Görsel olarak, nötrletirici antijen R6'nın ilave edilmesinden sonra pembe bir renk gözlemlenebilir. 490 nm'de yapılan fotometrik bir okuma ile kaplarda nötrletirici antijen R6 bulunup bulunmadıı kontrol edilebilir. (bkz. bölüm 13: REAKTF LAVELERNN SPEKTROFOTOMETR LE KONTROL EDLMES). 5. R7a konjugat solüsyonunu ilk inkübasyon sona ermeden önce hazırlayın. 6. Yapıkan filmi çıkarın; her kabın içeriini çekerek atık konteynerine boaltın, ardından dört kez yıkayın. 7. Önceden sulandırılmı 100 l R7a konjugat solüsyonunu hızlı bir ekilde her kaba daıtın (bkz. bölüm 8: REAKT FLER N YEN DEN OLUTURULMASI) v eya, konjugat önceden sulandırılmadan da kullanılabileceinden, her kaba sırasıyla, 80l sulandırılmı R2, ardından 20l R7a konjugatı ilave edin. Homojenletirin. Üstünü yapıkan bir filmle örtün ve 37°C ± 1 °C sıcaklıkta 30 dakika (minimum 25 dakika, maksimum 40 dakika) inkübe edin. Yapıkan filmi çıkarın; her kabın içeriini çekerek atık konteynerine boaltın, ardından be kez yıkayın. Not: Görsel olarak, konjugat R7a'nın ilave edilmesinden sonra mor bir renk gözlemlenebilir. 620 nm'de yapılan fotometrik bir okuma ile kaplarda konjugat R7a bulunup bulunmadıı kontrol edilebilir. (bkz. bölüm 13: REAKTF LAVELERNN SPEKTROFOTOMETR LE KONTROL EDLMES). 8. Enzimatik developman solüsyonunu (R8 + R9) hazırlayın 9. Her kaba hızlı bir ekilde 80 l developman solüsyonu ilave edin ve plakayı 30 dakika ± 5 dakika karanlıkta ve ortam sıcaklıında (+18-30°C) tutun. Not: Pembe renkte olan developman solüsyonunun daıtılması, ilemlerin bu aamasında görsel olarak kontrol edilebilir. Bo bir kap ile pembemsi renkteki developman solüsyonunu içeren bir kap arasında önemli bir renk farkı vardır (otomatik kontrol için paragraf 13'e bavurun: NUMUNE VE REAKTF LAVELERNN SPEKTROFOTOMETR LE KONTROL EDLMES). 10. Her kaba hızlı bir ekilde 100 l durdurma solüsyonu (R10) ilave edin. Not: Renksiz olan durdurma solüsyonunun daıtılması, ilemlerin bu aamasında görsel olarak kontrol edilebilir. Substratın pembemsi (negatif numuneler için) veya mavi (pozitif numuneler için) olan rengi, durdurma solüsyonu ilave edildikten sonra renksiz hale gelen (negatif numuneler için) veya rengi sarıya dönen (pozitif numuneler için) kaplardan kaybolur. 11. Okuma yapmadan önce 4 dak. bekleyin. 12. Plakanın altını özenle silin ve reaksiyonun sona ermesini müteakip 30 dakika içerisinde 450/620 nm'de optik younluu okuyun. b) Ag HBe test protoko lü 1. 2. Yıkama solüsyonunu hazırlayın. Taıyıcı çerçeve ile gerekli sayıda eridi koruyucu ambalajdan çıkarın. Kullanılmayan eritleri tekrar ambalajın içine yerletirin ve ambalajı kapatın. Kaplara art arda aaıdaki malzemeleri daıtın (önerilen plaka planı): • A1, B1, C1: 100 l negatif kontrol (R3) • D1: 100 l pozitif kontrol (R5) • E1, F1, G1: 100 l bilinmeyen numune Kullanılan sisteme balı olarak, kontrollerin konumu veya daıtım sırası deitirilebilir. Not: Görsel olarak, effaf bo bir kap ile numune içeren (açık sarı) bir kap arasında net bir renk farkı görülebilir. 490 nm'de fotometrik ölçüm yapılarak kaplarda numune olup olmadıı kontrol edilebilir (bkz. bölüm 13: REAKTF LAVELERNN SPEKTROFOTOMETR LE KONTROL EDLMES). 3. 8 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. Üstünü yapıkan bir filmle örtün; 37°C ± 1°C sıcaklıkta 3 saat ± 10 dakika inkübe edin. R7b konjugat solüsyonunu ilk inkübasyon sona ermeden önce hazırlayın. Yapıkan filmi çıkarın; her kabın içeriini çekerek atık konteynerine boaltın, ardından dört kez yıkayın. Önceden sulandırılmı 100 l R7b konjugat solüsyonunu hızlı bir ekilde her kaba daıtın (bkz. bölüm 8: REAKTFLERN YENDEN OLUTURULMASI) veya konjugat önceden sulandırılmadan da kullanılabileceinden, her kaba sırasıyla, 80 l sulandırılmı R2, ardından 20 l R7b konjugatı ilave edin. Homojenletirin. Üstünü yapıkan bir filmle örtün ve 37°C ± 1°C sıcaklıkta 30 dakika (minimum 25 dakika, maksimum 40 dakika) inkübe edin. Not: Görsel olarak, konjugat R7b'nin ilave edilmesinden sonra turkuaz mavisi bir renk gözlemlenebilir. 620 nm'de yapılan fotometrik bir okuma ile kaplarda konjugat R7b bulunup bulunmadıı kontrol edilebilir. (bkz. bölüm 13: REAKTF LAVELERNN SPEKTROFOTOMETR LE KONTROL EDLMES). Filmi çıkarın; her kabın içeriini atık konteynerine boaltın, ardından be kez yıkayın. Enzimatik developman solüsyonunu (R8 + R9) hazırlayın Her kaba hızlı bir ekilde 80 l developman solüsyonu ilave edin ve plakayı 30 dakika ± 5 dakika karanlıkta ve ortam sıcaklıında (+18 - 30°C) tutun. Not: Pembe renkte olan developman solüsyonunun daıtılması, ilemlerin bu aamasında görsel olarak kontrol edilebilir. Bo bir kap ile pembemsi renkteki developman solüsyonunu içeren kap arasında önemli bir renk farkı vardır. (otomatik kontrol için paragraf 13'e bavurun: NUMUNE VE REAKTF LAVELERNN SPEKTROFOTOMETR LE KONTROL EDLMES). Her kaba hızlı bir ekilde 100 l durdurma solüsyonu (R10) ilave edin. Not: Renksiz olan durdurma solüsyonunun daıtılması, ilemlerin bu aamasında görsel olarak kontrol edilebilir. Substratın pembemsi (negatif numuneler için) veya mavi (pozitif numuneler için) olan rengi, durdurma solüsyonu ilave edildikten sonra renksiz hale gelen (negatif numuneler için) veya rengi sarıya dönen (pozitif numuneler için) kaplardan kaybolur. Okuma yapmad an önce 4 dak. bekleyi n. Plakanın altını özenle silin ve reaksiyonun sona ermesini müteakip 30 dakika içerisinde 450/620 nm'de optik younluu okuyun. c) Aynı plaka üzer ind e Anti-H Be ve Ag HBe test pr otokolü Protokoller daha önce tanımlananlar ile tamamen aynıdır. Sadece plaka üzerindeki dizili düzeni farklıdır. • Anti-HBe testi: Sütun 1 ila 6 • Ag HBe testi: Sütun 7 ila 12 12 - HE SA PLA MALA R V E SONUÇLA RIN YORU MLAN MA SI a) Anti-HBe testi: 1. Negatif kontro ller in orta lama o ptik youn lu unu h esapl ayın: R3 OPTK YO UNLU U Örnek: Negatif Kontr ol R3 1 2 3 Toplam = OPTK YO UNLUK 1,607 1,410 1,552 4,569 Ortalama R3 O ptik Yo unl uu = 4,569 / 3 = 1,523 Optik Younluk deeri ortalamadan %25 sapma gösterdiinde, bir negatif kontrolün deerini elimine etmek mümkündür. Bu durumda, ortalamayı dier iki deer üzerinden hesaplayın. 2. Eik dee rin h esapl anması Her plaka için, eik deer: Eik deer = VS = R3 OPTK YO UNLU U x 0,4 Örnek: R3 OPTK YO UNLU U = 1,523 VS = 1,523 x 0,4 = 0,609 3. Anti-HBe testi nin o nayla nması R3 OPTK YO UNLU U > 0,900 R4 OPTK YO UNLU U < 0,150 4. Oran ların h esapl anması Her numune için oranı hesaplayın: Oran= Numune Optik Younluk Deeri/VS 9 5. Sonuçl arın Yo ruml anması Oranı 0,9 deerine eit veya bu deerin altında olan tüm numuneler pozitif kabul edilir (oran 0,9). Oranı 1,1 deerinin üzerinde olan tüm numuneler negatif kabul edilir (oran > 1,1). 0,9 ile 1,1 arasındaki oranlar için (0,9 < oran 1,1), daha sonra alınacak bir numunede tekrar anti HBe aratırması yapılması tavsiye edilir. Pozitif numunelerin çift olarak tekrar teste tabi tutulması tavsiye edilir. Testin tekrarlanmasından sonra, 2 çiftten en az birinin deeri pozitif ise, numune pozitif addedilir. b) Ag HBe testi 1. Negatif kontro ller in orta lama o ptik youn lu unu h esapl ayın: R3 OPTK YOUNLUU Örnek Negatif Kontr ol R3 1 2 3 Toplam = OPTK YOUNLUK 0,023 0,022 0,026 0,071 Ortalama R3 O PTK YOUNLU U= 0,071 / 3 = 0,024 OPTK YOUNLUK deeri ortalamadan %25 sapma gösterdiinde, bir negatif kontrolün deerini elimine etmek mümkündür. Bu durumda, ortalamayı dier iki deer üzerinden hesaplayın. 2. Eik dee rin h esapl anması Her plaka için, eik deer: Eik deer = VS = R3 OPTK YOUNLUU + 0,025 Örnek: R3 OPTK YOUNLUU = 0,024 Adım = 0,025 VS = 0,024+ 0,025 = 0,049 3. Ag HBe testini n onayl anması R3 OPTK YOUNLUU < 0,060 R5 OPTK YOUNLUU > 0,800 4. Oran ların h esapl anması Her numune için oranı hesaplayın: Numune Opt. Yo. Oran = -----------------------------VS 5. Sonuçl arın Yo ruml anması Oranı 1 deerinin altında olan tüm numuneler negatif kabul edilir (oran < 1). Oranı 1 deerine eit veya bu deerin üstünde olan tüm numuneler pozitif kabul edilir (oran 1). Pozitif numunelerin çift olarak tekrar teste tabi tutulması tavsiye edilir. Testin tekrarlanmasından sonra, iki çiftten en az birinin deeri pozitif ise, numune pozitif addedilir. 13 - RE AKTF L AV ELER NN SP EKTROFOTOMETR L E KON TROL EDL MES ANT- HBe TEST NUMUNE VE KONTROL LAVE SNN KONTROL EDLMES Kaplarda numune ve kontrol bulunup bulunmadıı 490 nm'de yapılacak fotometri ölçümü ile kontrol edilebilir. OPTK YOUNLUK deeri 0 ,050'nin üzerinde olmalıdır. Görsel olarak, effaf bo bir kap ile numune içeren (açık sarı) bir kap arasında net bir renk farkı gözlemlenebilir. NÖTRLETRME Ag LAV ESNN (R6) KONTROL EDLME S Kaplarda R6 bulunup bulunmadıı, 490 nm'de yapılan bir okuma vasıtasıyla, OPTK YOUNLUK delta deerinin hesaplanması ile kontrol edilebilir. OPTK YOUNLU K Delta De eri = (numune (veya kontrol) ve nötrletirici antijen R6 mevcut iken 490 nm'de kabın OY deeri) – (sadece numune (veya kontrol) mevcut iken 490 nm'de kabın OY deeri). OPTK YOUNLUK farkı 0,150'nin üzerinde olmalıdır. Görsel olarak, R6'nın ilave edilmesinden sonra pembe bir renk gözlemlenebilir. KONJUGAT (R7a) L AVE SNN KONTROL EDLMES Konjugat bulunup bulunmadıı 620 nm'de yapılan fotometrik bir okuma ile kontrol edilebilir. OPTK YOUNLUK deeri 0,070 ile 0,200 arasında olmalıdır ( 0,070 O Y 0 ,200) Görsel olarak, R7a'nın ilave edilmesinden sonra mor bir renk gözlemlenebilir. 10 DEVELO PMAN SOLÜ SYONU LAV ES N N KONTROL ED LMES (R8+R9 ) Developman solüsyonu bulunup bulunmadıı, 490 nm'de yapılan fotometrik bir okuma ile kontrol edilebilir. OPT K YOUNLUK deeri 0 ,100'ün üzerinde olmalıdır. Görsel olarak, developman solüsyonunun ilave edilmesinden sonra, pembe bir renk gözlemlenebilir. HBe Ag TEST NUMUNE VE KONTROL LAVE S N N KONTROL ED LMES Kaplarda numune ve kontrol bulunup bulunmadıı 490 nm'de yapılacak fotometri ölçümü ile kontrol edilebilir. OPT K YOUNLUK deeri 0,050'nin üzerinde olmalıdır. Görsel olarak, effaf bo bir kap ile numune içeren (açık sarı) bir kap arasında net bir renk farkı gözlemlenebilir. KONJUGAT (R7b) L AVE S N N KONTROL ED LMES Konjugat bulunup bulunmadıı 620 nm'de yapılan fotometrik bir okuma ile kontrol edilebilir. OPT K YOUNLUK deeri 0,210'un üzerinde olmalıdır. Görsel olarak, R7b'nin ilave edilmesinden sonra turkuaz mavisi bir renk gözlemlenebilir. DEVELO PMAN SOLÜ SYONU LAV ES N N KONTROL ED LMES (R8+R9 ) Developman solüsyonu bulunup bulunmadıı, 490 nm'de yapılan fotometrik bir okuma ile kontrol edilebilir. OPT K YOUNLUK deeri 0,100'ün üzerinde olmalıdır. Görsel olarak, developman solüsyonunun ilave edilmesinden sonra, pembe bir renk gözlemlenebilir. 14 - PE RFORM ANSL AR Aaıda özetlenen Monolisa™ HBe Ag/Ab PLUS testinin sonuçları kan donörlerinden, hastaneye yatırılmı hastalardan ve ticari panellerden alınan numuneleri kullanan iki kuruluta deerlendirmeye tabi tutulmutur. Ayrıca, analitik duyarlılık PEI standardı yardımıyla belirlenmitir. HBe Ag Özgüll ük 200 kan donöründen oluan bir popülasyonda incelenen özgüllük oranı, %100 [%98,51 - %100], (GA %95) olarak bulunmutur. Özgüllük oranı ayrıca hastaneye yatırılmı hastalardan alınan numunelerde de incelenmi ve %100 [%99,28 – %100] GA % 95 (416/416) olarak bulunmutur. Hepatit B'ye balı olmayan farklı patoloji özelliklerine sahip 195 numune (viral ve bakteriyel enfeksiyonlar, romatoid, otoantikor, veya anti-fare faktörleri açısından pozitif numuneler, miyelom numuneleri, hamile kadınlardan alınan numuneler) teste tabi tutulmutur. Bu popülasyonun özgüllük oranı %99,49 idi [%97,18- %99,99] (GA %95), yani 194/195 numune negatif bulunmutur. 1 miyelom numunesi diskordans göstermektedir. Anal itik Duyarlılık PEI Standardı yardımıyla belirlenen duyarlılık limiti 0,64 UI/ml [0,49 – 0,84] (GA %95) olarak bulunmutur. Klinik Duya rlılık Duyarlılık, kronik hepatit hastalarından, ticari panellerden ve serokonversiyonlardan elde edilen 203 numune üzerinde test edilmitir. Bu numunelerin tamamı üzerindeki duyarlılık %99,51 [%97,29 - %99,99] (GA %95) yani 202/203 numunedir. Hassasiyet Monolisa™ HBe Ag/Ab Plus (HBe Ag) testinin hassasiyeti 4 numune yardımıyla belirlenmitir: HBe Ag açısından 1 negatif, 1 zayıf pozitif, 1 orta pozitif, 1 güçlü pozitif. Test içi inceleme, her numunenin aynı test sırasında 30 kez teste tabi tutulması ile gerçekletirilmitir. Testler arası inceleme, her numunenin çift olarak 20 gün boyunca günde 2 teste tabi tutulması ile gerçekletirilmitir. Sonuçlar öyledir: Tablo 1: Test içi n = 30 Numune 1 Numune 2 Numune 3 Numune 4 Oranların ortalaması 0,356 5,29 27,24 45,56 Standart sapma 0,05 0,35 0,63 2,88 Varyasyon Katsayısı (%) 14,20 6,53 2,31 6,33 11 Tablo 2: Testler a rası n = 80 Numune 1 Numune 2 Numune 3 Numune 4 Oranların ortalaması 0,51 8,19 27,33 46,35 Standart sapma 0,12 1,17 3,26 4,98 Varyasyon Katsayısı (%) 23,86 14,27 11,92 10,74 HBe Ac Özgüll ük 200 kan donöründen oluan bir popülasyonda incelenen özgüllük oranı, %100 [%98,51 - %100], (GA %95) olarak bulunmutur. Özgüllük oranı ayrıca hastaneye yatırılmı hastalardan alınan 206 numunede de incelenmi ve %98,54 [%95,80 – %99,70] GA %95 (203/206) olarak bulunmutur. Hepatit B'ye balı olmayan farklı patoloji özelliklerine sahip (viral ve bakteriyel enfeksiyonlar, romatoid, otoantikor veya anti-fare faktörleri açısından pozitif numuneler, miyelom numuneleri, hamile kadınlardan alınan numuneler) 198 numune teste tabi tutulmutur. 3 numune pozitif bulunmutur (2 HCV numunesi ve 1 romatoid faktör numunesi). Bu popülasyonun özgüllük oranı %98,48 idi [%95,64- %99,69] (GA %95), yani 195/198 numune negatif bulunmutur. Bu numuneler tekrar teste tabi tutulmutur; romatoid faktör numunesi tekrar pozitif bulunmutur; 2 HCV numunesi tekrar, ya negatif ya da üpheli bulunmutur. Klinik Duya rlılık Duyarlılık, kronik hepatit hastalarından ve ticari panellerden elde edilen 220 numune üzerinde test edilmitir. Bu numunelerin duyarlılıı %98,64 [%96,07 - %99,72] (GA %95) yani 217/220 numunedir. Hassasiyet Monolisa™ HBe Ag/Ab Plus (HBe Ac) testinin hassasiyeti HBe Ac açısından 1 negatif, 1 zayıf pozitif, 1 orta pozitif, 1 güçlü pozitif numune olmak üzere, 4 numune yardımıyla belirlenmitir. Test içi inceleme, her numunenin aynı test sırasında 30 kez teste tabi tutulması ile gerçekletirilmitir. Testler arası inceleme, her numunenin çift olarak 20 gün boyunca günde 2 teste tabi tutulması ile gerçekletirilmitir. Sonuçlar öyledir: Tablo 1: Test içi n = 30 12 Numune 1 Numune 2 Numune 3 Numune 4 Oranların ortalaması 3,15 0,69 0,42 0,03 Standart sapma 0,05 0,04 0,04 0,00 Varyasyon Katsayısı (%) %1,7 %5,7 %10,5 %6,6 Tablo 2: Testler a rası n = 80 Numune 1 Numune 2 Numune 3 Numune 4 Oranların ortalaması 2,39 0,81 0,59 0,03 Standart sapma 0,23 0,077 0,09 0,01 Varyasyon Katsayısı (%) %9,6 %9,5 %14,5 %39,3 15 - KA YN AKÇ A 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. MIYAKAWA Y.; MAYUMI M.; (1985) Hepatitis Be antigen and antibody (HBe Ag/Anti-HBe) in Hepatitis B. Academic Press., chap. 4: 47-76 KANNO A.; OHORI H., MATSUDA K.; NAKAYAMA H.; MIYAZAKI Y.; ISHIIM.; SUZUKI H.; OHTSUKI M.; GOTO Y. (1 987) Virological significance of HBe Ag subtypes (HBe Ag/1 and HBe Ag/2) in patients with type B hepatitis. Hepatology; 7 (1) 15-19 BRECHOT C.; (1987) Les marqueurs et la prévention des infections par le virus de l’hépatite B en 1987. Encyclopédie Médicochirurgicale; Instantanés Médicaux, 4; 9-12 THIERS V.; BOUCHARDEAU F.; COUROUCE A.M.; TIOLLAIS P.; BRECHOT C., (1986) L’ADN du virus de l’hépatite B comme marqueur de multiplication virale: comparaison avec l’antigène HBe et l’anticorps anti Hbe. La Presse Médicale: 15: 1219-1 222 LAROUZE B., PENALBA C., DAZZA M.C. (1983) Signification des marqueurs sériques du virus de l’hépatite B. Biologiste et praticien; 56; 13-22 ALDERSHVILE J., FROSNER G.G.; NIELSEN J.O.; HARDT F. DEINHARTD F.; SKINHOJ P., (1980) Hepatitis Be antigen and antibody measured by radioimmuno-assay in acute hepatitis B surface antigen positive hepatitis. J. Infect. dis.: 141 (3), 293-297 TAKAHASHI K.; IMAI M., TSUDA F., TAKAHASHI T., MIYAKAWA Y. MAYUMI M. (1976) Association of Dane particles with e antigen in the serum of asymptomatic carriers of hepatitis B surface antigen. J. of Immunol. 117 (1); 102 – 105 13 (GB) (FR) (ES) (IT) (DE) (PT) (SE) (DK) (GR) (PL) (LT) (HU) (EE) (SK) (CZ) - CE marking (European directive 98/79/CE on in vitro diagnostic medical devices) Marquage CE (Directive européenne 98/79/CE relative aux dispositifs médicaux de diagnostic in vitro) Marcado CE (Directiva europea 98/79/CE sobre productos sanitarios para diagnóstico in vitro) Marchiatura CE (Direttiva europea 98/79/CE relativa ai dispositivi medico-diagnostici in vitro) CE Konformitätskennzeichnung (Europäische Richtlinie 98/79/EG über In-vitro-Diagnostika) Marcação CE (Directiva europeia 98/79/CE relativa aos dispositivos médicos de diagnóstico in vitro) CE-märkning (Europeiskt direktiv 98/79/EG om medicintekniska produkter för in vitro-diagnostik) CE-mærkningen (Europa direktiv 98/79/EF om medicinsk udstyr til in vitro-diagnostik) CE ( 98/79/CE in vitro ) (GB) (FR) (ES) (IT) (DE) (PT) (SE) (DK) (GR) (PL) (LT) (HU) (EE) (SK) (CZ) - For in vitro diagnostic use Pour diagnostic in vitro Para diagnóstico in vitro Per uso diagnostico in vitro In-vitro-Diagnostikum Para uso em diagnóstico in vitro In vitro-diagnostik In vitro diagnose in vitro (GB) (FR) (ES) (IT) (DE) (PT) (SE) (DK) (GR) (PL) (LT) (HU) (EE) (SK) (CZ) - Manufacturer Fabricant Fabricante Produttore Hersteller Fabricante Tillverkad av Fremstillet af (GB) (FR) (ES) (IT) (DE) (PT) (SE) (DK) (GR) (PL) (LT) (HU) (EE) (SK) (CZ) - Batch code Code du lot Código de lote Codice del lotto Chargen-Bezeichnung Código do lote Batchnr Batchkoden CE oznaczenie (Dyrektywa unijna 98/79/CE dotycząca produktów medycznych do badań in vitro) CE ženklas (Europos sąjungos direktyva 98/79/CE dėl in vitro diagnostikos medicinos prietaisų) CE jelzés (98/79/CE Európai Irányelv az in vitro orvosi diagnosztikai eszközökről) CE märgistus (Euroopa direktiiv 98/79/CE in vitro diagnostikameditsiiniseadmete kohta) CE označenie o zhode (Európska direktíva 98/79/CE pre in vitro diagnostické zdravotnícke postupy) CE značka (Evropská direktiva 98/79/CE o diagnostických zdravotnických prostředcích in vitro) (NO) - CE-merking (EU-direktiv 98/79/CE om medisinsk utstyr til in vitro-diagnostikk) (RO) - Marca CE (Directiva europeana 98/79/CE pentru dispozitive medicale de diagnostic in vitro) (BG) - СЕ маркировка (Европейска директива 98/79/CE за ин витро диагностичните медицински изделия) IVD Do stosowania in vitro in vitro diagnostikai Csak in vitro diagnosztikai alkalmazásra In vitro diagnostiliseks kasutamiseks Na diagnostiku in vitro Pro diagnostiku in vitro (NO) - Til in vitro-diagnostikk (RO) - Pentru diagnostic in vitro (BG) - За ин витро диагностика Producent Gamintojas Gyártó Tootja Výrobca Výrobce (NO) - Produsent (RO) - Producător (BG) - Производител Numer serii Serijos numeris Gyártási szám Partii kood Číslo šarže Číslo šarže (NO) - Partikode (RO) - Număr de lot (BG) - Партиден номер (GB) (FR) (ES) (IT) (DE) (PT) (SE) (DK) (GR) (PL) (LT) (HU) (EE) (SK) (CZ) - Catalogue number - Référence catalogue - Número de catálogo - Numero di catalogo - Bestellnummer - Número de catálogo - Katalognummer - Katalognummer - - Numer katalogu - Katalogo numeris - Cikkszám - Katalooginumber - Katalógové číslo - Katalogové číslo (GB) (FR) (ES) (IT) (DE) (PT) (SE) (DK) (GR) (PL) (LT) (HU) (EE) (SK) (CZ) - Authorised Representative Représentant agréé Representante autorizado Distributore autorizzato Bevollmächtigter Representante Autorizado Auktoriserad representant Autoriseret repræsentant (GB) (FR) (ES) (IT) (DE) (PT) (SE) (DK) (GR) (PL) (LT) (HU) (EE) (SK) (CZ) - Expiry date YYYY/MM/DD Date de peremption AAAA/MM/JJ Estable hasta AAAA/MM/DD Da utilizzare prima del AAAA/MM/GG Verwendbar bis JJJJ/MM/TT Data de expiração AAAA/MM/DD Utgångsdatum ÅÅÅÅ/MM/DD Anvendes før ÅÅÅÅ/MM/DD YYYY/MM/DD (NO) - Katalognummer (RO) - Număr de catalog (BG) - Каталожен номер Upoważniony Przedstawiciel Įgaliotasis atstovas Meghatalmazott Képviselő Volitatud esindaja Autorizovaný zástupca Zplnomocněný zástupce (NO) - Autorisert representant (RO) - Reprezentant autorizat (BG) - Упълномощен представител Data ważności YYYY/MM/DD Galioja iki YYYY/MM/DD Szavatossági idő ÉÉÉÉ/HH/NN Aegumistähtaeg AAAA/KK/PP Použiteľné do RRRR/MM/DD Datum exspirace RRRR/MM/DD (NO) - Utløpsdato ÅÅÅÅ/MM/DD (RO) - Data expirarii AAAA/LL/ZZ (BG) - Срок на годност година/месец/ден (GB) (FR) (ES) (IT) (DE) (PT) (SE) (DK) (GR) (PL) (LT) (HU) (EE) (SK) (CZ) - Storage temperature limitation - Limites de températures de stockage - Temperatura límite - Limiti di temperatura di conservazione - Lagertemperatur - Limites de temperatura de armazenamento - Temperaturbegränsning - Temperaturbegrænsning - - Temperatura przechowywania - Saugojimo temperatūriniai apribojimai - Tárolási hőmérsékleti határok - Piirangud säilitustemperatuurile - Skladovacia teplota od do - Teplotní rozmezí od do (NO) - Oppbevaringstemperatur (RO) - Limitele de temperatură la stocare (BG) - Температурни граници на съхранение (GB) (FR) (ES) (IT) (DE) (PT) (SE) (DK) (GR) (PL) (LT) (HU) (EE) (SK) (CZ) - Consult Instruction for use - Consulter le mode d'emploi - Consulte las instrucciones de uso - Consultare le istruzioni per uso - Siehe Gebrauchsanweisung - Consulte o folheto informativo - Se bruksanvisningen - Se instruktion før brug - - Sprawdź instrukcję - Ieškokite informacijos vartojimo instrukcijoje - Olvassa el a használati utasítást - Kasutamisel vaata instruktsiooni - Katalógové číslo - Viz návod k použití (NO) - Se bruksanvisninger (RO) - Consultati prospectul de utilizare (BG) - Виж инструкцията за употреба Bio-Rad 3, bd Raymond Poincaré 92430 Marnes-la-Coquette - France Tél.: +33 1 47 95 60 00 Fax.: +33 1 47 41 91 33 01/2009 Code: 883560