MiKRODALGA KULLANIMI iLE TESPiT EDiLMiŞ SlÇAN
Transkript
MiKRODALGA KULLANIMI iLE TESPiT EDiLMiŞ SlÇAN
Vet. Hil. Dcrg. (19%), 12,2:133-140 MiKRODALGA KULLANIMI iLE TESPiT EDiLMiŞ SlÇAN PARATiROiD DOKULARININ IŞIK VE ELEKTRON MiKROSKOPTA iNCELENMESi Mehmet Kanterı Zeynep Kahveci2 Erdal Karaöz3 Şahin A. Sırmalı2 The Examination of Rat Parathyroid Tissues Fixed by Microwave Enhancement on Light and Electron Microscopy Summary : In this study, rat parathyroid (PT) tissues, fixed by microwave enhancement and by immersion fixation, were compared to evaluate the quality differences between these two fixation methods. For the reason, a part of tis sues were exposed to microwave for 6 seconds at 50-55°C after fixed with 5% glutaraldehyde (GA) in 0.1 M sodium phosphate for 1 O minutes. The other part of tissues were fixed in the same fixative for 3 h at 4°C. Later, a routine electron microscopic procedure was applied on both tissue groups. In examination of tissues fixed by microwave en hancement, many uniform cells besides very few number of light and dark cells were observed. However, in tissues fixed by immersion fixation, many uniform cells besides smail number of light and dark cells were observed. In com parison of microwave enhancement fixation to immersion fixation, the appsarance of cells, fixed by microwave en hancement were more homogen but cell membranes were not clear in the light microscopy, rough endoplasmic re ticulum cisternae (RER) and mitochondria were slightly dilated in electron microscopy than immersion fixation. Finally, there were no technical differences between two methods. However, the changes in parathroid cell morphology with immersion fixation method were rarely observed in that with microwave enhancement fixation method. Key words: Microwave, ımmersion, fixation. parathyroid, microscopy. Özet : Bu çalışmada, sıçan paratiroid ( PT) dokularında mikrodalga ışınımı ile artırılmış fiksasyon ve immersiyon fik sasyon sonucu elde edilen preparatlarda, fiksasyon kalitesi açısından bir farklılı�ın bulunup bulunmadığı araştırıldı. Bu amaçla, doku örneklerinin bir kısmı 0.1 M sodyum fosfat tamponu varlığında %5'1ik glutaraldehid (GA) içerisinde 1 O da kika bekletildikten sonra (ıslatma aşaması) 50-55°C'de 6 sn süreyle mikrodalga ışınımına tabi tutuldu. Diğer doku ör nekleri ise, aynı fiksatif içerisinde 4°C'de 3 saat bekletilerek tespit edildi. Daha sonra her iki doku örnekleri grubuna da rutin elektron mikroskobik doku takibi işlemleri uygulandı. Mikrodalga ışınımı ile artırılmış fiksasyonla elde edilen pre paratların incelenmesinde, çok sayıda üniform �ücrenin yanısıra bir-iki adet açık ve koyu hücrelere; immersiyon fik sasyonla elde edilen preparatlarda ise, üniform hücrelerle birlikte az sayıda da açık ve koyu hücrelere rastlandı. Ay rıca, mikrodalga ışınımı ile artırılmış fiksasyonla elde edilen preparatların immersiyon fiksasyon sonucu elde edilenlere göre, yarı ince kesitlerde, hücre görünümlerinin daha homojen, fakat hücre membranlarının yer yer belirsiz; ince ke sitlerde ise, granüllü endoplazmik retikulum sistemaları (ger) ve mitokondriyonların hafif dilale olduğu gözlendi. So nuçta, her ıki metod arasında teknik açıdan belirgin bir farklılığın olmadığı; ancak, paratiroid hücre morfolojisinde im mersiyon yöntemiyle gözlenen değişikliklerin, mikrodalga yönteminde çok nadir görüldüğü saptandı. Anahtar kelimeler: Mikrodalga, immersiyon, fiksasyon, paratiroid, mikroskopi. sirnde ısı artışı; radyasyonun düzeyine, materyalin Giriş fiziksel. termal ve dielek1rik özellikleri ile cismin şek Mikrodalga ışınımı. doku örneklerinin her �ok tasında istenilen ısının kısa sürede elde edilmesini line bağlıdır (Kok ve Boon, 1990). Fiksatifler, gömme materyalleri ve boyalar mikrodalga ışınımı ile doku blok ve kesitlerine daha hızlı penetre olur sağlayan etkili bir yöntemdir (Kok ve Boon, 1990). lar. Doku proteinleri ısı yardımıyla doğrudan doğ doku örnekleri içten dışa doğru ısınır. Difüzyon iş lanır Mikrodalga enerjisi ile yapılan ısıtma işleminde, lemi ve kimyasal reaksiyonların hızı üzerine ısı"nın artırıcı 1990). bir etkisi vardır (Horobin ve Flemming, Mikrodalga ile ışınlanmış homojen bir ci- ruya danatüre edilerek dokunun fiksasyonu sağ (Horobin ve Flemming, 1990). Doku kesitlerinin bayanması sırasında da mikrodalga fırın kullanımı ile kısa sürede daha iyi· sonuç alındığı bil dirilmek1edir (Kennedy ve Foulis, 1989). Geli Tarihi : 06.06. 1996 1. Y.Y.Ü. V eteriner Fakültesi Histoloji ve Embriyoloji Anabilim Dalı, V AN. 2. U.Ü. Tıp Fakülte i Histoloji ve Embriyoloji Anabilim Dalı, BURSA. 3. S.D.Ü.Tıp Fakültesi. Histoloji ve Embriyoloji Anabilim Dalı, ISPARTA. KANTER, KAHVECİ. KARAÖZ, SfRMALI Bu metodun doku fiksasyonunda ilk kez 1970'li yıllarda kullanılmaya (Kok ve Boon, 1990). başlandığı (inaktif) hücreler ve bu iki hürce tipi arasında geçiş belirtilmektedir formunu oluşturan intermediyer hücreler olarak ta Bu amaçla, çeşitli doku ör nımlandı (Roth ve Raisz, 1966; Roth ve Capen, nekleri, farklı sıcaklık, süre ve fiksatifler kullanılarak 1974; Capen, 1980; Wild, 1980). Bununla birlikte, mikrodalga fırında tespit edildi. Elde edilen sonuç son çalışmalarda, çeşitli fiksasyon yöntemlerinin incelendiğinde, immersiyon fiksasyona göre, ışık (immersiyon, perfüzyon ve mikrodalga ışınımı ile ar veya elektron mikroskopik seviyelerde benz.er so tırılmış immersiyon) ve bu fiksasyonlarda kullanılan nuçlar alındığı görüldü (Login, 1978; Leong ve ark., farklı fiksatif (GA, GA-FA vb.) ve tampon çözeltilerin 1985; Login ve Dovarak, 1985; Kayser ve ark., (Na-K/fosfat, Na-cacodilat, Hepes vb.) paratiroid 1988; Leong, 1988; Umar ve ark., 1990; Kahveci, 1993). hücrelerinin Deri üzerinde yapılan bir çalışmada, fik sasyon sonrası takip aşamalarında mikrodalga tırını kullanılarak 15 dakikada bloklama işleminin ya pılabileceği gösterildi (Boon ve ark., 1986). Balaton da, fiksasyon, dehidratasyon, mikrodalga fırınların 1988; Wild ve ark., 1989). Bu çalışma, sıçan paratiroid dokularının birinci fiksasyonu gös rodalga ışınımı öncesi dokulwn fiksatif içerisinde 15 dakika fırınının kul edilen preparatlar arasında, teknik açıdan bir fark sasyonda ısının ışınımdan daha etkili olduğu so ark., mikrodalga preparatlar ile immersiyon fiksasyon sonucu elde �dilen dokularla yapılan diğer bir çalışmada, tik (Hopwood ve esnasında lanılmasıyla elde edilen ışık ve elektron mikroskopik termiştir (Balaton, 1987). Mikrodalga fırında fikse nucuna varıldı değişikliklere 1988; Setoguti ve ark., 1988; Shoumura ve ark. , saydamlaştırma, kullanılabileceğini önemli ve ark., 1986; Marti ve ark., 1987; Emu ra ve ark., gömme ve kesitierin kurutulması aşamalarında kla sik morfolojisinde neden olduğu bildirilmektedir (Larsson, 1984; Wild lılığın bulunup bulunmadığını ortaya koymak ve pa 19138). Mik ratiroid hücre morfolojisini her iki yöntemle ayrıntılı tespit olacağı bi� şekilde incelemek amacıyla planlanmıştır. bekletilmesi (ıslatma y aşaması) halinde morfolojik yapının daha i i ko runduğu gösterildi (Login ve Dovarak, 1988). Formaldehid veya glutaraldehid · gibi Materyal ve Metot fik satiflerde immersiyon yöntemiyle tespit edilmiş pa Çalışmada, 4 adet 250-300 g ağırlığında Wiss ratiroid parankim hücrelerinin, insan ve memeli tar Albino cinsi sıçanlar 5-7 mg/1OOg sodyum hayvanlarda farklı görünümlere sahip hücre top pentobarbital ile anestezi edildi. Bu sıçanların her lulukları içerdiği kabul edilmektedir. Bu hücreler; üniform, açık, iki paratiroid bezleri sterio mikroskop altında dik koyu ve multinükleer hücrelerdir katlice alındıktan sonra, hemen buzla soğutulmuş (Lever, 1957; Roth ve Raisz, 1966; Alten%ohr ve Leonhardt, 1972; Capen, 1980; Berghdal PBS ile yıkandı ve yaklaşık 1 mm3'1ük parçalara ay rıldı. Denemede ER 535 MT modelinde, iç boyutları ve Boquist, 1973; Meuten ve ark., 1984). Önceleri 295x187x314 mm, 550 watt çıkış güçlü, mikrodalga düşük yoğunluklu sitoplazmaları olan hücreler açık salınımı 2450 MHz olan Vestei/Goldstar marka, hücreler, yüksek yoğunluklu sitoplazmaya sahip mutfak tipi mikrodalga fırın kullanıldı. Mikrodalga fı hücreler ise, koyu hucreler olarak adlandırıldı (Roth ve Capen, 1974). Elektron mikroskopik rında özel bir kap içinde bulunan GA'nın ısısını sap ça tamak amacıyla güç, zaman ve sıcaklık ölçümleri lışmaların başlamasıyla, koyu hücrelerin (aktif form) yapıldı. çok sayıda hücre organeline sahip olduğu, açık Sıcaklık ölçümlefi, ışınım uygulandıktan hemen sonra mikrodalga fırıryın kapağı açılarak ci (inaktif form) hücrelerin ise, daha az sayıda organel valı termometre ile alındı. Mikrodalga fırın güç se içerdiği gösterildi (Lever, 1957). Daha sonra, pa viyesi 1'de tutulduğunda 6 saniyede GA'nın sı caklığı, fiksasyon için uygun olduğu düşünülen 50- ratiroid bezinde gözlenen farklı hücre tiplerinin sik lik değişiklik1erden kaynaklandığı kabul edildi. Buna 55 °C'de sabit kaldı. Doku örneklerinin bir kısmı, 0.1 göre, parathormon .sentezinden sorumlu hücreler ! M sodyum fos at tamponu varlığında % 5'1ik glu sentez evrelerine göre; çok sayıda organel içeren tara ldehid (GA) içerisinde 1 O dakika bekletildikten koyu (aktif) hücreler, az sayıda organel içeren açık 1 34 Mikrodalga kullanımı ilc tesbit edilmiş sıçan paratiroid ddkularının ışık ve clektron ... Tablo ı'. Farklı tespit yöntemleri uygulanan örnı: klerdeki PT hücre tipleri. Fiksasyon metodu Fiksatif Tampon Çözelti PT hücre varyasyonu Mikrodalga ışınımı %5GA Sodyum fosfat Çok sayıda üniform, bir iki adet açık %5 GA Sodyum fosfat Çok sayıda üniform, az sayıda açık ve koyu hücre ve koyu hücre ile artınlmış fiksasyon Immersiyon fiksasyon sonra 50-55 oc 'de 6 saniye süreyle olduğu görüldü. Kromatin, düzenli bir yapı gösteren mik çekleştirildi. kalizasyonunda gözlendi. Diğer doku örnekleri ise. aynı fiksatif parinükleer lo Üniform bir yapı gös teren hücrelerde, çoğunlukla hafif dilale olmuş gra içerisinde 4 °C'de 3 saat bekletilerek tespit edildi. nüllü endoplazmik retikulum sistemalarma ve kıista Daha sonra her iki gruba ait doku örnekleri 0.1 M yapıları sodyum fosfat tamponunda iki kez 1O' ar dakika sü seçilemeyen mitokondriyonlara rastlandı (Şekil 2,3). Immersiyon fiksasyonda ise, hücrelerin reyle yıkandı. Bu doku örnekleri 4 °C'de 1 saat sü plazma membranlarının oldukça katiantılı ve in reyle Os0 4 ile ikinci fiksasyona tabi tutuldu ve yı kama işlemi aynı şekilde tekrarlandı. Bu aşamadan tersellüler mesafelerde yer yer genişlernelerin ol duğu gözlendi. Hücrelerde, çekirdek kesitlerinin dü sonra, her iki gruba ait doku örneklerine rutin eleki zensiz ran mikroskobik takip yöntemleri uygulandı. Epon ve çok sayıda serbest ribozom içeren sitoplazmik matliksin farklı yoğunlukta olduğu be bloklardan elde edilen yarı ince kesitler toluidin ma lirlendi. Granüllü endoplazmik retikulum sistemaları visi, ince kesitler ise Mg-uranilasetat ve kurşun sit rat ile boyandı. çoğunlukla çekirdekterin rodalgalama işlemine tabi tutularak fiksasyon ger normal yapılarını korlırken, mitokondriyonların yer Preparatların ışık (Oiympus BHT) yer dilale olduğu görüldü (Şekil 5, 6). ve elektron (Zeiss EM-10) mikroskopik incelemeleli · yapılarak fotoğraflama işlemleri gerçekleştirildi. Tartışma ve Sonuç Bulgular Isının fiksasyonu artırıcı bir etkiye sahip ol duğunun belirlenmesinden sonra, bu konuda mik Paratiroid hücre morfolojisine ait bulgular yu rodalga fırınlartarla pek çok çalışma yapılmıştır (Kok karıdaki tabloda özetlenmiştir. ve ark., 1988). Bir ısı çeşidi olan mikrodalga rad Mikrodalga ışınımı ile artırılmış fiksasyon ve im yasyonu, mersiyon fiksasyon yöntemleri ile tespit edilmiş hücrelere rastlandı. Bu faklı bir rad vansiyonel bir fırına konan bir organ parçası, dıştan toplazmaları farklı yoğunlukta boyanan polig.:>nal parankimal radyasyondan yasyon türüdür (FeirabenrJ ve ark., 1992). Kon sıçan paratiroid bezlerinin, yarı ince kesitlerinde, si şekilli iyonizan hüc içe doğru ısındığından, (Horobin ve çekleşen fiksasyon, 1990; relerin, çok sayıda damar ve az miktarda bağ doku Kok ve Boon, 1990) dış fiksatifin Flemming, bölümde ger derine pe natrasyonunu engelleyen bir bariyer oluşturur (Ho ile birbirinden ayrılmış gruplar ve kısmen de küçük robin ve Flemming, 1990). failiküller oluşturduğu gözlendi (Şekil 1, 4). Mikrodalga fırınlarda ise, ısı artışına bağlı olarak kimyasal reaksiyonlar Mikrodalga ışınımı ile artırılmış fiksasyonla elde hızlandığından, liksatilin difüzyon gücü artar ve fik edilen preparatların incelenm�sinde çok sayıda üni sasyon işlemi içten dışa doğru gerçekleşir (Kok ve form hücrenin yanısıra bir-iki adet açık ve koyu hüc Boon, relere (Ş�kil 1 ); immersiyon fiksasyonla elde edilen 1990). Mikroqalgalama fiksasyonu için uygun sıcaklığın 50-70 oc oldugu; bu sıcaklığın al preparatlarda ise, üniform hücrelerle birlikte az sa tında ve üstünde yapılan liksasyonlardan histolojik yıda da açık ve koyu hücrelere rastlandı (Şekil 4). olarak kötü sonuçlar alındığı bildirilmektedir (Hop Mikrodalga ışınımı ile tespit edilmiş preparatlarda, wood ve ark., 1988; Kok ve Boon, 1990; Kahveci, ince yapı düzeyinde, ·hücrelerin plazma memb 1993). Bu çalışmada da 50-55 °C'Iik sıcaktık kul lanılmıştır (Kok ve 8oon, 1990; Kahveci, 1993) .. ranının az katiantılı ve intersellüler mesafelerin dar 135 KANTF.R. KAHVHCI. KARAÖ'l.. SIRMAU Ülkemizde bu konuda yapılan çalışmalarda, endoplazmik retikulum (ger) membranlarında ise, daha çok patolojik materyaller kullanılmıştır. Bu ma yüzey genişlemelerine neden olduğunu göstermiştir teryallerin laboratuvara ulaşana kadar geçen ıs (Wild ve Schraner, 1989). tatma aşaması konusunda belli bir standart yoktur fiksasyonda karaciğer, iskelet kası, periferal sinir, (Umar ve ark., mik pankreas, tiroid ve adrenal korteks gibi dokularda rodalgalama öncesi dokuların tespit olacağı fiksatif membranların daha iyi korunduğu bildirilmiştir (Wild içerisinde 15 dakika bekletilmesinin (ıslatma aşa ve ark., 1989). 1989). Bununla birlikte, Mikrodalga ile artırılmış ması) optimum sonuç verdiği bildirilmektedir (Login Son yıllarda gerçekleştirilen birçok çalışmada, ve Dovarak, 1988). Bu çalışmada da, doku par paratiroıd bezinde gözlenen 4 ayrı hücre tipinin çalarının küçüklüğü de dikkate alınarak. ısiatma (üniform, açık, koyu ve multinükleer hücreler) farklı aşaması 10 dakika ile sınırlanmıştır. fiksasyon metodlarından kaynaklanabileceğıne ıli� Bir çok araştırmada, mikrodalga fiksasyon yön kin önemli veriler elde edilmiştir (Lever, 1957; Roth teminin, fiksasyon süresini kısahmasının yanısıra, ve Raisz, 1966; Alten%ohr ve Leonhardt, 1972; konvansiyonel fiksasyona eşit kalitede hatta bazı Berghdal ve Boquist, 1973; Capen, 1980; Meuten dokularda daha iyi kalitede ışık ve elekıran mik ve ark., 1984). Sıçan (Wild ve ark., 1985; Setoguli roskopik preparatların elde edilmesine imkan sağ ve ark., 1988), çöl faresi (Larsson ve ark., 1984) ve ladığı gösterilmiştir (Boon ve ark , 1986; Kok ve kedilerde (Wild ve ark., 1986) perfüzyon fiksasyon ark., 1988; Wild ve ark., 1989; Wild ve Schraner, yöntemiyle paratiroid bezinde farklı hücre form 1989; Kok ve Boon, 1990; Kahveci, 1993). Mor larının oluşumu önlenmıştir. Marti ve ark. (1987) da fik yüksek basınç-derin dondurucu tekniği ya da bir sasyonların. paratiroid hücrelerinde volümün art mikrodalga kaynağı ile sitimule edilen sığır ve sıçan masına, paratiroidlerinin immersiyon fiksasyon metodu ile fometrik analizler, hücre mikrodalga membranları ile artırılmış ve granüllü Şekıl 1. Mı'Krodalga ışınımı ile artınlmış fiksasyon yöntemiyle tespit edilen preparatlaıdakı paratırold hOcrelennın ışık mıkroskopik görOnomı:ı. O: Oniform hOcre, a: açık hOcre, k: koyu hOcre (To luidin mavisi x 480) 136 likrodıılga kullanımı Ilc tesbit edilmi� sıçun paratirold dokularının ışı k ve clcktron ... Şekıl 2 Mıkrodalga ııtınımı de artınlmış fıksuyon yöntemiyle tespıt edılen paratirold do kusunun ınce yapı dOzayındeki görunumil 0: uniform hucre (EM x 2500). Şekıl 3. Mıkrodalga ışınımı ile artınlmış fıksasyon yöntemıyle tespit edilen paratıroid do· kusuna aıt bır görünüm. o� az hOcre zan katiantısına sahip Oniform hücreler. ç: dü zenli şekılli oval çekirdek. ger: kısmen cilate granOIIO endoplazmik retıkulum sis· temalan, m: krista yapılan dejenere mıtokondriyonlar, okbaşı: dar hücreler arası mesafe (EM x 9800). 137 KANTIR. KAIIVI.- l'l. Kr\RA()'l, �IRMAI 1 Ştıkıl 4 Immersıyon lıksasyon yontamıyle ıospıı edılmış preparatlarda sıtopıazmaıan farldı yogunlukta boyanan hOcreler u· unıform hucre, a: oçık hucre, k: koyu hucre,(Toluıdın mavisi. x 480) Şekıl 5 Immersıyon fıksasyon yontamtyle tespıt edllmış paratıroıd dokusunun ınce yapı duzeyınclekı görünomu O· üniform hOcre, a· açık hOcre, k: koyu hucre. ç: çe kirdek. ok: çok fazla hucr e zarı katıantısına sahıp koyu hOcre, okbaşı. genış huc reler arası mesafe (EM x 2500). 138 . Mikrodalga kullanıını ilc tesbit edilmiş sıçan paratiroid dokularının ışık ve clcktron... Şekıl 6. Immersiyon fiksasyon yöntemıyle tespıt edilmiş paratıroid dokusunun daha büyük büyütmedeki göronümü. ç: düzensiz şekilli çekirdek, ü: üniform hücre, a: açık hücre, okbaşı: geniş hücreler arası mesafe, ger: granOIIO endoplazmik re tikulum, m: mitokondıiyon (EM x 5600). incelenmesinde, farklı hücre tiplerinin oluşmadığını Berghdal, L. and Boquist, L. gözlemişlerdir. hology in Normal Dogs. Pathol. Eur. Bu çalışmada da, immersiyon fiksasyon me Boon, M. E. toduyla sıçan paratiroidlerinden hazırlanan pre , (ı 973). Parathyroid Morp 8, 95-103. Kok, L. P. and Ouwerkerk-Noordam E. (ı 986). Microwave Stimulated Diffusion for Fast Pro cessing ol Tissue:Reduce d Dehydrating, Clearing and paratlarda gözlenen farklı tip hücre formlarının, mik rodalga kaynağı ile artırılmış fıksasyon yönteminde lmpregnating Times. HistopathaL ı O, nadir Capen, C.C. görüldüğü saptanmıştır. Ayrıca, mik rodalgalama yönteminin ince yapı düzeyinde de, 303-309. (1980). Parathyroid Hormone, Calcitonin, and Cholecalciferol: The Calcium Regulating Hormones. immersiyon yöntemir:ıe yakın sonuçlar verdiği göz In: lenmiştir. Bununla birlikte, mikrodalga ışınımı ile ar rodu.ctions; McDonald, Veterinary Endocrinology and Rep 3 rd ed., 62-ı14, Lea and Febigger, Phi ladelphia. tınlmış fiksasyonda gözlenen dilate olmuş granü11ü endoplazmik retikulum ve mitokondriyonların var Emura, S., Shoumura. S., lshizaki, N., Yamahira, T., lto, lığı, çalışmada kullanılan mutfak tipi mikrodalga fı M. and lsono, H. rında ısı ölçümlerinde yapılan hata sonucu ola rathyroid Glands in Golden Hamsters of Different Ages, bileceği sonucuna varılmıştır. with Special Reterence to the Frequency of Lipid. Acta Anat. 133, 96-101. Feirabend, H. K. P. , Ploeger,S. ,Kok, P and Choufoer, Kaynaklar H. (1992). Does Microwave lrradiation Have Other Than Thermal Altenahr, E. and Leonhardt, F. (1988). Effects of Starvation on the Pa Effects on Histological Staining of the Marn malian CNS? Eur. J. Morphol. (1 972). Suppression of 30, 312-327. Parathyroid Gland Activity by Magnesium: Morphometric Hopwood, D. Miline, G. and Pentson, J. Ultrastruc\ural lnve_stigation. Virchows Arch. A. Pathol. parison of Microwaves and Heat Alone in the Preparation Anat. of Tissue for Electron Microscopy. Histochem. J. 355, 297-308. Balaton, A. 22, 358-364. (1987). Applicatons des Micro-Ondes Dans les Techniques Histologiques. Ann. Pathol. 7, (1990). A Com Hopwood, 242-245. ı39 0., Yı!aman, G. and Milne, G. (1 988). Oif- KANTER. KAIIVt:<.:l. KARAÜ:t� SIRMAIJ ferentıatıng the Efiacts of Mıcrowave and Heat on nssue Martı. R. Wıld, P., Sehraner, E . M , Müller, M. and Moor. Proteıns and Their Crossllnklng By Formaldehyde. His H. (1987). Parathyrold Ultrasıructure After Aldehyde Fi tochem. J. 20. 341·3A6. xation, High Pressure Freezıng, or Microwave lrradiation. R W. Horobın. and Flemmıng, L shooting' Microwave Accelerated Procedures in His· tology and Histochemistry:Understanding and Dealing wıth Artefacts, Errors and J. Histochem. Cytochem. 35, 1415-1424. (1990). eTrouble Hazards. Histochem. Meuten, GV J. Syncytal Cells in Canine Parathyroıd Roth, SJ and Capen, C.C. (1974). Ultrastruetural and Kahvecı. Z. 1993). Değişik Dokuların Fiksasyonunda Functıonal Correlations Mıkrodalganın Kullanımı. Doktora Tezi, Bursa. Stute, H.. Lubcke, K. (1988, Rapd M crowave Fixaıion a Cofl'lleraırve Morp· hometnc Study. Hıstochem Roth, S.,. and Wazınskı. U J ıhe Rat Parathyroid Gland 1n Organ Culture. Setoguti. T. Staining of Cryostat 42, tOt-105. Tıss . Res. Shoumura, S.. lwasaki, Y.. lshizaki. N.. Emura. S., Ya toprocessıng wıth the Mıcrowave Oven: an Update. His roterenol on the Fine Structure of the Hamstef Pa rathyroid Gland. Hıstol. Histopathol. 3, 225-233. Larson. H.O. Lorentzon. R and Boquıst, L. (1984). Sıructure of Paraıhyroid Glands. as Revealed by Umar, M.H .• Dif Ü ve Falakalı. S. Uygulanması. Ege Unıversıtesı Tıp Fakültesi Electron Microscopic Study ın Untreated Mongolıan Ger Derg. 28 (4),1773-1780. bıls. Ceıı nss Res 235. 51 ·58. Umar, M.H., Pabuçcuoglu, H.U. and ÖCal, Ş.D. (1990). Mıcrowave lrradiatıon ın His- Histoteknikte Modıltye Mıkrodalga Metodu. Türk PatolOJI topathology Pathol. Ann 2 (23), 213-233. Daymon M. E and Mlllion, Pabuçcuoglu, H.U., lrıce, (1989). Mikro Elektromagnetık Dalgalann Histotekniğe terenı Methods of Fixation. A Quantıtative üght and Derg 6 (2). 6770. J (1985) Wıld. P. (1980). Correlatrve Light and Electron Mıc Mıcrowave lrradatton as a Form of Fıxation for Lıght and Eleetron Microseopy (1988). Bectron mahıra. T . lıo. M. arıd lsona. H. (1988). Effects of lsop tochem. J. 20. 323-328. • Shln. M. radatıon in the Rat Parathyroid Gland. Cell Kok. L. P., Vısser. P.E. and Bonn, M.E. (\988). H'ıs· Leong. A.S.Y lnoue, Y. and 251, 531-539. roscopy. Mıcrosc. 158, 291·322. (1 988) Lab. lnvest. Microscopic Studies and the Acc:erelation of Their Deg L P. and Boon. M. E. (1990). Microwaves for Mic Leong. A.S Y. Re 15, 1187-1211 Kennedy. A and Foulıs, A K (1989). Use of Mıcrowave J. Clin. Pathol. and Raishz LG (1966). The Course and versıb�ıty or the Calcıum Elfeel on the Ultrastructure of J 20.347-352. Oven lfl'llroves Morphology and of the Paraıhyroid Gland lnv. Rev Exp. Palhol. 13, 161·221 Kayser Kok. .• Glands Veı. Paıhol 21, 463-468. 22,371-376 Sectıons. D.J Capen, C.C., Thompson, K.G. and Segre, (1984). roscopıc Study of Parathyroid Glands in J. Palhol 146, 313-321. Dogs of Dıf lereni Age Groups. Aeta Anat. 108, 340·349. Lever. J. D. (1957). Fine Structural Appearences in the Wild, P . Gloor, S. and Vetsch, E. (1985). Quantitatıve Rat Parahtyroid J Anal. 91. 73 81 Aspects of Membrane Behaviour in Rat Parathyroid Cells Login. G. . R. (1978). After Depressıon or Elevaııon ol Serum Calcium. Lab. In· Mıcrowave Fixatıon Versus For vest. 52. 490-496. malin Fixaııon ol Surgical and Autopsy nssue Am. J. Med. Techno!. 44, 435·437. Logın, G.R and Dovarak. Wıld, P .• A.M. (1985). Krahenbüht and Schraner. E.M. (1989) tency ol Mıcrowave lrradiation Microwave Po Durıng Fıxation for Elect Energy Fıxaııon Provıdes Exeeliant Preservatıon of Tıs· ron Mıcroscopy. Hıstochem. 91, 213·220. sue Wıld. P. and Schraner. E. M (1989). Quanııtaııve As Cells and Anttgens for Ught and Electron Mıc • roseopy. Hıstochem. J. 20, 373-387. Login. G.R. and Dovorak, A.M. (1988). Microwave Enhanced Fıxatıon ol Parathyroids. Hıstoclıem 92. 69-72. Fı xaılon Provıdes Exeelieni Preservaııon of nssue. Cells and Antıgens for ügth and Electron Mıcroscopy . sessment of Cellular Changes Provoked by Microwave Wild, P. and Schraner, E.M. (1986): Ultrastructural Al teraııons tn Mammalıan Parathyroid Glands lnduced by HtS tochem. J. 20. 373-387. Fixation Acta Anat. 126. 87·96. 140